显色底物DAOS是一种含有苯胺基的磺酸钠衍生物,CAS号:83777-30-4,属于一种非常灵敏的显色试剂,DAOS属于一种Trinder’s试剂,是生化试剂盒里的一种非常重要的原料,显色试剂作为指示剂的反应由于可以直接用分光光度计进行测量,甚至肉眼可见,这里以其在血脂检测系列的检测做简单介绍。
在血液中,胆固醇通常是与载脂蛋白结合成复合物的脂蛋白的形式,分为四种:高密度脂蛋白HDL、低密度脂蛋白LDL、极低密度脂蛋白VLDL和乳糜微粒,其中LDL参与将胆固醇运送至外周细胞,而HDL负责从细胞中吸收胆固醇。目前检测高密度脂蛋白主要是先监测出总胆固醇含量和高密度脂蛋白的含量及甘油三酯含量来计算LDL浓度。
DAOS可用于胆固醇检测
检测总胆固醇时,先通过胆固醇酯酶CHE将胆固醇酯水解成胆固醇和脂肪酸,再用胆固醇氧化酶将其催化氧化成4-胆甾烯酮并生成过氧化氢,然后就是通过DAOS和4-AAP偶联,与过氧化氢在POD催化下产生显色反应,通过测定吸光度就可以测定出总胆固醇的浓度。
DAOS可用于甘油三酯检测
检测甘油三酯时,甘油三酯在脂蛋白酯酶(LPL)存在下线水解成甘油和脂肪酸;甘油和ATP在甘油激酶(GK)催化下生成甘油-3-磷酸和ADP;甘油-3-磷酸和氧在甘油-3-磷酸氧化酶(GPO)催化下生成二羟丙酮磷酸和过氧化氢,之后就与上面步骤一样用显色底物与4-AAP偶联与过氧化氢产生显色反应,测出TG浓度。
DAOS可用于高密度脂蛋白检测
检测高密度脂蛋白时,采用双试剂形式反应,试剂一中含有聚阴离子和表面活性剂,选择性与VLDL、LDL结合,并抑制试剂二中COD,CEH对VLDH-CH、LDH-CH起作用,从而选择性作用于HDL-CH,通过CEH-COD-POD作用,再通过测量吸光度测定出HDL的浓度,最后通过计算便可得出LDL浓度。
显色底物DAOS的z大吸收波长在593nm,比MAOS略低,但其反应可以保持长时间不褪色,受血清或其它样本中其他物质干扰小,检测结果精确性高。德晟在显色底物的合成研发上经验非常丰富,产品涵盖多种显色底物以及对应的酶制剂,欢迎广大客户合作!