色原底物ADPS是辣根过氧化物酶HRP或过氧化物酶POD常用的显色底物,化学名称是N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲氧基苯胺钠盐二水合物,高水溶性,是一种新型Trinder’s试剂。
耦联氧化系统:
ADPS是在传统的Trinder’s试剂苯酚或苯胺的基础上研发出的新型Trinder’s试剂,生化检测中用于过氧化氢H2O2耦联的指示系统。这个系统用的非常广泛,包含传统色原苯酚,德晟新型Trinder’s试剂(如ADPS试剂、MAOS、TOOS等)等。
HRP酶的色原底物ADPS的显色原理
H2O2在过氧化物酶的作用下,可使单一个或成对的无色的色素原氧化成有色的色素,导致某一波长吸光度的增加,因此可用来测定物质的浓度或活性。用于此指示系统的单一色素原有TMB、ABTS等;成对色素原有酚和4AA、MBTH和DMA等。
应用此系统的临床项目有:TC(血清总胆固醇)、TG(甘油三酯)、HDL-C(高密度脂蛋白胆固醇)、LDL-C(低密度脂蛋白胆固醇)、Glu(血糖)、Cr(肌酐)、UA(尿酸)等。
ADPS显色原理:
H2O2在POD的催化作用下,ADPS与4AA(4-氨基安替吡啉)耦联氧化生成醌亚胺类物质,导致500nm处吸光度增加。以Glu(血糖)的检测为例,Glu与氧气、水在GOD催化下生成葡萄糖酸和双氧水H2O2(过氧化氢),生成的过氧化氢则可以用ADPS的耦联氧化系统测定,吸光度增加的程度与Glu成正比,用分光广度法测吸光度的增加量即可测量血糖含量。
除了德晟ADPS之外,新型Trinder’s试剂还有TOOS,MAOS,MADB等,在过氧化氢和POD的存在下能与4-氨基安替比林 (4-AA) 或3-甲基苯并噻唑砜腙(MBTH) 的氧化偶合反应过,形成非常稳定的紫色或蓝色染料(与MBTH偶合染料的摩尔吸光度比与4-AA偶合染料的高1.5-2倍;然而,4-AA溶液比MBTH溶液更稳定)。
葡萄糖、酒精、酰基-辅酶A和胆固醇等可以用作检测与新型Trinder's试剂及4-AA偶合的那些底物。德晟生化现有包括ADPS在内的10种新型Trinder's试剂,以及吸收波长更高的DA64和DA67。