酶联免疫分析中辣根过氧化物酶HRP有着多种底物,其中新型Trinder’s试剂时灵敏度高、干扰少的一类显色底物,这类试剂有包括TOOS、ALPS、MAOS等十多种类型,它们之间有什么区别呢?
新型Trinder’s试剂是在传统色原底物苯酚或苯胺的基础上发展改进而来的,在传统色原的基础上,进行一些官能团的取代、修饰等,使色原的水溶性、试剂相容性、稳定性、显色产物的最大吸收波长改变等,德晟科技重点开发了十种色原底物新型Trinder’s试剂。
新型Trinder's试剂TOOS、ALPS、MAOS区别
我们知道,Trinder’s试剂的检测原理都是利用其参与反应后生成特定吸收波长的显色产物,再用分光光度法测量在某一特定最大吸收波长处的吸光度变化,从而分析待测物的浓度的。那么不同色原底物的颜色反应产物最大吸收波长和吸光强度就决定了色原底物的性能差异。
通过Trinder反应试验我们统计出:
实验结果表明色原底物ALPS, TOOS, TODB,TOPS的显色产物摩尔吸光度较高,这意味着颜色反应的灵敏度较高,既可以进行一些血清中很微量的待测项的测定。
而色原MAOS与MADB的吸收波长较高,达到了630nm,受血清或其它样本中其他物质干扰更小,可以针对需要高精确值的检测项。
另外在显色产物褪色情况方面,TOOS, ADOS,DAOS所形成的颜色反应产物吸光度随时间变化不大,即颜色反应产物稳定,不易褪色。但MAOS的产物则褪色明显,检测时需及时观测数据。
可以将不同Trinder’s试剂的差异总结如下:
1,TOOS在吸收波长,颜色反应强度以及褪色方面均有较好的表现,所以TOOS最常用。
2,当然,对于特定待测项,其含量极其微量,那么就需要用到ALPS,TODB 。
3,又如有的待测项在550nm~600nm,会有干扰,那就可以选择MADB,MAOS。
在实际应用中,有些指标检测对应的新型Trinder’s试剂区别并不大,可以替换使用,所以可以看到不同公司的诊断原料或试剂盒中检测同一项生化指标时运用了不同的色原底物。德晟开发的十种色原底物可以满足不同公司需求。