体外诊断中,酶的底物有很多种,包括ADPS、MAOS,发光底物鲁米诺、异鲁米诺,直接发光试剂吖啶酯等。这些底物实验时都需要配成溶液,那么它们的溶解性能就是一个关键因素了。
德晟的研发项目之一是对传统的一些试剂进行改性,使它们用于生化检测时性能更好,使用更方便,通过官能团修饰改变亲水性就是其中一种试剂改性方式。ADPS、鲁米诺、吖啶酯这些底物,它们的亲水性或者溶解性都是不同的。
底物ADPS、鲁米诺、吖啶酯的溶解性
显色底物比如ADPS、TOOS、DAOS及MAOS等都属于新型Trinder’s试剂,是在传统色原苯酚、苯胺及其衍生物的基础上研发出来的高水溶性的苯胺钠盐,使用时可以直接配成水溶液或者溶于缓冲溶液。
发光底物鲁米诺及异鲁米诺,在水中的溶解度小于0.1g/100mL,易溶于有机溶剂,但是可以溶于碱性溶液中。因此将做鲁米诺化学发光实验或制备鲁米诺的ECL发光液时,需要用NaOH来配置碱液。还有一种情况是,将鲁米诺制成鲁米诺钠盐,这也能大大增加鲁米诺的水溶性,可直接用于中性溶液。
发光底物吖啶酯,其实它可以直接化学发光反应,严格说不算的酶的底物,是在鲁米诺之后发展出的发光试剂。吖啶酯水溶性很差,使用时先溶于无水DMF(N,N-二甲基甲酰胺),我们的吖啶酯3~6 号在 1~2 号的基础上,在亲水性上进行了修饰,引入了丙磺酸内盐,增加了其水溶性,使其与抗体、 核酸等形成的标志物有水溶性,在之后的发光检测可以在水中进行。
物质的溶解通常遵循相似相溶原理,极性溶剂溶解极性物质,非极性溶剂溶解非极性物质,含有相同官能团的物质互溶。试剂极性从小到大:烷、烯、醚、酯、酮、醛、胺、醇和酚、酸,例如:己烷-石油醚、苯、乙醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、丙酮、乙醇、甲醇、水。