在临床检验和生物医学研究领域,抗凝剂有很重要的作用,它们能够阻止血液凝固,以便进行各种血液检测和分析。EDTA K2抗凝剂是常用的一种,与其他抗凝剂,如肝素锂、肝素钠、枸橼酸钠等抗凝剂相比,它具有独特的性能和特点。并且这几种抗凝剂在抗凝机制、对血细胞的影响、适用的检测项目以及稳定性与保存条件等方面都存在差异。
一、抗凝机制
1、EDTA K2抗凝机制:EDTA(乙二胺四乙酸)K2主要通过与血液中的钙离子(Ca2?)螯合来发挥抗凝作用。钙离子在血液凝固过程中是多个凝血因子激活所必需的,EDTA K2与 Ca2?形成稳定的螯合物,从而阻断了凝血级联反应的进行。这种抗凝机制能够在不明显影响血液中其他成分的情况下有效地抑制血液凝固。例如,在血常规检测中,EDTA K2抗凝的血液样本可以准确地反映红细胞、白细胞和血小板的数量和形态,因为它对这些细胞成分的直接影响较小。
2、肝素抗凝机制:肝素则主要通过增强抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)的活性来抗凝。抗凝血酶Ⅲ能够抑制多种凝血因子,如凝血酶(Ⅱa)、因子Ⅹa、Ⅸa、Ⅺa 和Ⅻa 等。肝素与 ATⅢ结合后,使 ATⅢ的构型发生改变,显著提高其对凝血因子的抑制作用,从而阻止血液凝固。肝素的抗凝作用迅速且强大,但它的作用相对较为复杂,可能会对一些凝血相关的检测产生较大影响,如进行凝血功能检测 APTT(活化部分凝血活酶时间)、PT(凝血酶原时间)。
3、枸橼酸钠抗凝机制:枸橼酸钠是通过与血液中的钙离子结合形成难解离的可溶性络合物,从而降低血液中的钙离子浓度,达到抗凝目的。其抗凝效果相对较弱,主要用于凝血功能检测等特定项目。
二、对血细胞的影响
1、对红细胞的影响:EDTA K2对红细胞形态影响最小。在显微镜下观察,EDTA K2抗凝的红细胞能够保持其正常的形态,这使得在进行红细胞相关指标检测如红细胞计数、血红蛋白测定、红细胞压积以及红细胞形态学检查时,能够获得较为准确的结果。
2、对白细胞的影响:EDTA K2不影响白细胞计数及大小,能够使白细胞在样本中均匀分布,便于进行白细胞分类计数和总数测定。白细胞的各类细胞在 EDTA K2抗凝的血液中能够保持其正常的形态和特性,有利于通过血液分析仪准确识别和分类。肝素和枸橼酸钠可能不太适用于白细胞检测。
3、对血小板的影响:EDTA K2可以抑制血小板的聚集,便于准确计数血小板数量。同时,它对血小板形态的影响也较小,有利于进行血小板形态学检查。而肝素会导致血小板聚集,使血小板计数偏低,并且会引起血小板形态发生改变,不利于血小板相关疾病的诊断。枸橼酸钠抗凝时,血小板也可能会有一定程度的聚集。
三、适用的检测项目
1、EDTA K2适用项目:由于其对血细胞形态和计数影响小的特点,EDTA K2抗凝剂适用于大多数常规血液学检验,如血常规、血型鉴定等。在这些检测中,EDTA K2能够提供稳定且准确的血液样本。例如,在血常规检测中,多数实验室都采用 EDTA K2抗凝的血液样本,确保各项血细胞指标的准确测定。
2、肝素适用项目:肝素主要适用于一些需要快速抗凝且对凝血功能检测有特殊要求的项目,以及一些特殊的凝血功能检测如抗凝血酶Ⅲ活性测定等,如在血浆测试中推荐使用,以及用于血糖、电解质检测等项目。
3、枸橼酸钠适用项目:枸橼酸钠主要用于凝血功能检测项目,如 PT、APTT、凝血酶时间(TT)等。在这些检测中,严格控制枸橼酸钠与血液的比例(通常为 1:9)是关键,因为这直接影响到检测结果的准确性。此外,枸橼酸钠也可用于红细胞沉降率(ESR)测定,它能够使血液在特定条件下形成稳定的血浆层和红细胞层,便于观察红细胞沉降的速度。
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