在化学和生物学领域,缓冲液能够维持溶液的 pH 值稳定,为各种化学反应和生物过程提供适宜的环境。MES 缓冲液,即 2 - 吗啉乙磺酸缓冲液,其缓冲范围为 pH5.5 - 6.7,这个范围在一些特定的实验中非常有用。例如,在活性氨基凝胶层析柱分离脑微管蛋白的流动相成分中,MES 缓冲液的这个 pH 范围能够提供稳定的环境,确保实验的准确性。
一、MES 缓冲液 pKa 值及特点
1、pKa 值接近生理pH:MES 缓冲剂的 pKa 值接近生理 pH,在许多生物过程中,pH 值的变化会对生物分子的结构和功能产生影响。MES 缓冲液能够在接近生理 pH 的条件下维持稳定的 pH 环境,有利于研究生物分子的活性和功能。
2、不能被细胞膜吸收且可透过紫外线:MES 在通过细胞膜的时候不能被吸收,这一特性使得它在细胞培养实验中非常有用。不会被细胞吸收的缓冲液可以避免对细胞内部环境产生不必要的影响,从而保证细胞的正常生长和代谢。
3、广泛应用于植物细胞培养:在植物细胞培养过程中,MES 缓冲液能够为植物细胞提供适宜的生长环境,促进植物细胞的健康生长。
二、MES 缓冲液的配方
如果是配置pH为6,浓度为100mM的MES缓冲液1L,其配方如下:
1、所需材料
(1)MES(2 - 吗啉乙磺酸)原料:用于提供缓冲能力。
(2) DEPC 水:用于溶解 MES 和调节溶液的体积。
(3) NaOH 溶液(1N 或 10N):用于调节溶液的 pH 值
2、具体配置步骤
(1)称量 0.1mol 或者 19.5g MES,溶解于 500mL DEPC 水中。在称量 MES 时,应使用准确的天平,确保称量的准确性。将 MES 缓慢加入 DEPC 水中,同时搅拌,促进 MES 的溶解。
(2)用 1N 或者 10N 的 NaOH 溶液调节 pH 至 6.0。在调节 pH 值时,应逐滴加入 NaOH 溶液,并不断搅拌和监测溶液的 pH 值。操作时应小心谨慎,避免接触皮肤和眼睛。
(3)定容至 1L,4°C 保存。在定容时,应使用准确的容量瓶,确保溶液的体积准确无误。将配置好的 MES 缓冲液储存在 4°C 的环境中,可以延长其保质期,保持其稳定性。
三、MES 缓冲液在实验中的注意事项
1、选择合适的缓冲范围和缓冲能力:在选择缓冲液时,应根据实验的具体要求选择合适的缓冲范围和缓冲能力。MES 缓冲液的缓冲范围为 pH5.5 - 6.7,如果实验需要在这个 pH 范围内维持稳定的 pH 环境,那么 MES 缓冲液是一个不错的选择。同时,还应考虑缓冲液的缓冲能力,即缓冲液抵抗外界酸碱影响的能力。
2、注意实验内容的特殊性:不同的实验内容可能对缓冲液有特殊的要求。例如,在生物实验中,应注意缓冲液是否对生物分子有影响,是否会干扰实验结果。在细胞培养实验中,应注意缓冲液是否对细胞有毒性,是否会影响细胞的生长和代谢。在植物组织培养实验中,应注意缓冲液是否与植物生长激素和营养物质兼容,是否会影响植物组织的生长和分化。
3、容器、水和其他添加液的灭菌:在生物实验中,容器、水和其他添加液的灭菌非常重要。未灭菌的容器、水和添加液可能会引入细菌、真菌等微生物,污染实验体系,影响实验结果。因此,在使用 MES 缓冲液进行生物实验时,应确保所使用的容器、水和其他添加液经过严格的灭菌处理。
MES 原料通过准确的配方和严格的操作,可以配置出高质量的 MES 缓冲液,为各种实验提供稳定的 pH 环境。在使用 MES 缓冲液时,应注意选择合适的缓冲范围和缓冲能力,考虑实验内容的特殊性,对容器、水和其他添加液进行灭菌,并注意储存和使用条件。湖北新德晟材料科技有限公司作为MES 原料生产厂家,其技术实力雄厚,为客户提供技术支持,MES 原料产品纯度高,无干扰杂质,各种生产机器设备先进,批量和定制都可以满足。欢迎采购者点击网站咨询!