干货分享!hepes缓冲液配比详解
在日常实验操作过程中使用较为频繁的就是缓冲液,但因其类型较多,像常见的有:磷酸盐、硼酸盐、Tris、HEPES等溶液,通常会根据实验要求来进行选择。这主要是因为缓冲液的选择错误会造成实验结果的偏差,如使用pH值相同的类型溶液,但因为某种离子导致沉淀现象,就可能使实验产生不需要的化学反应,影响实验操作。由于hepes溶液近期使用操作误区较多,所以下面就详细给大家介绍一下它。
作为一种非离子型的两性溶液,其pH值在7.2-7.4之间,是大多数实验中的选择溶液,例如用于生化诊断试剂盒和细胞培养液中。尤其是在开放式细胞培养中它可以较为稳定的维持pH值,并对细胞无毒性作用。具体的配比详解如下:
1、以配制500毫升的HEPES,PH等于7的储备溶液为例。首先准备119g的粉末溶解到400毫升的去离子水中,然后加入0.5-1M的氢氧化钠溶液,将其调节至所需要的pH值,再加入去离子水定容,在4度条件下保存即可。
2、如果是要在HEPES中加入少量盐,以500毫升为例,其配比方法为准备HEPES溶液6.5g,氯化钠8g,磷酸氢二钠七水合物0.19g,然后使用0.5M的氢氧化钠溶液调节pH值,进行定容。
3、如果是2×HEPES缓冲盐溶液的配制,需按照氯化钠1.6g,氯化钾0.074g,磷酸氢二钠二水合物0.027g和1g的HEPES充分溶解至90毫升的去离子水中,然后用0.5M氢氧化钠溶液调节至所需pH值,再用蒸馏水定容即可。
4、100 x HEPES贮存液配比为取23g的HEPES溶于90ml双蒸水中,然后添加1M氢氧化钠溶液调节pH值到7.5-8.0,加去离子水定容至100ml,过滤除菌,在4℃或-20℃保存下保存即可。
上述整理的配比方法较为普遍,但具体使用时要根据实验要求进行灵活配比。德晟作为生物缓冲液的生产商,所涉及的产品有Tris、Caps、Bicine、Mops、Hepes等多种,可完全满足客户实验要求,提供一站式采购,不仅节约时间,还降低了采购成本。同时为保证产品质量问题,质检人员对每批产品重复检测,使用时不会产生干扰检测结果的现象。如果您有意向,欢迎点击咨询购买!