三羟甲基氨基甲烷缓冲液,即Tris缓冲液,通常搭配盐酸来调节pH值配制缓冲剂,也有的是用醋酸、硼酸、甘氨酸等其它酸调节,而很多其它种类的缓冲剂如Bicine、MOPS、HEPES、CAPS等都是用氢氧化钠碱液来调节pH,这是Tris缓冲液的独特之处。
基础性质
Tris在室温(25℃下,它的pKa为8.1;根据缓冲理论,Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间。 Tris水溶液pH在10.5左右,一般加入盐酸以调节pH值至所需值,即可获得该pH值的缓冲液。Tris的pKa受温度影响较大,从而会导致pH值的改变,需要注意温度的影响。
Tris缓冲液的特点
三羟甲基氨基甲烷本身是一种弱碱,水溶液显碱性,因此配制缓冲液时使用盐酸来调节而不是用氢氧化钠。Tris分子结构中含有一个氨基,可以与醛发生缩合反应,因此在含有醛的体系中,使用Tris缓冲剂可能会受到影响。
Tris缓冲液适合核酸相关实验
Tris缓冲液通常是中性偏弱碱性,DNA核酸分子在这样的溶液中会被去质子化,从而提高溶解度。因此Tris可作为核酸的良好溶剂(也适合作蛋白的溶剂),在核酸相关的实验中,优先考虑使用Tris作为缓冲剂。在Tris盐酸盐缓冲液中还经常加入EDTA,制成TE缓冲液,可抑制核酸酶,抑制核酸的降解,提高核酸稳定性。在电泳缓冲液中经常用醋酸或硼酸来代替盐酸,比如用于核酸电泳实验的TAE缓冲液及TBE缓冲液。
除了核酸相关实验,Tris也经常用于蛋白质相关的实验,比如不同pH条件下蛋白质的生长实验采用Tris作为缓冲剂。由于Tris缓冲液不含金属离子,离子强度低的特点,还可以用于线虫核纤层蛋白的中间纤维的形成。德晟是生产厂家,可提供吨级以上的Tris供应。