发光的机理
发光反应中在形成电子激发态中间体之前，联结于吖啶环上的不发光的取代基部分从吖啶环上脱离开来，即未发光部分与发光部分分离，因而其发光效率基本不受取代基结构的影响。
水解机理
和吖啶酰胺在酸性溶液中(pH小于4.8)都很稳定，该类化合物及其与蛋白的偶联物在室温下保存4周，其光量子产率不降低；冻干品在-20℃下，可保存一年以上。但当pH大于4.8(尤其是在碱性溶液中),吖啶酯和吖啶酰胺类化合物由于发生部分水解而降低其稳定性，水解机理。在水溶液中当其受到OH-进攻时生成一假碱，假碱继续在OH-作用下酯键断裂，最后生成N-甲基吖啶酮，水解过程为不发光的暗反应过程。
不同点：
抵抗水解的能力不同
吖啶类化合物在水溶液中的水解程度，随pH值增大而增大；随温度升高而增大。大多数吖啶酰胺类化合物的稳定性较吖啶酯类高，其原因是由于C-N键与C-O键的键级不同,C-N键大于C-O键；吖啶酰胺类化合物抵抗水解的能力强于吖啶酯类。
热稳定性不同
对于吖啶化合物来说，吖啶环及酚环或苯磺酰环上，不连取代基与连接不同取代基其稳定性不同。通常吖啶环或酚环或苯磺酰环上,连有甲基等取代基的吖啶酯或吖啶磺酰胺，由于空间位阻大的原因热稳定性增加，连有吸电子基团时，因有利于亲核取代反应而使稳定性降低。
相同点：
无需催化剂
吖啶酯或吖啶磺酰胺类化合物化学发光不需要催化剂，在有H2O2的稀碱性溶液中即能发光,具有许多优越性，特别是无须一个催化过程，也不需要增强剂，从而降低了背景发光，提高了信噪比，干扰作用少。
易于与蛋白质联结
该类化合物作为化学发光免疫分析的发光标记物，还具有其它方面的优点,如光释放快速集中、发光效率高、发光强度大，易于与蛋白质联结且联结后光子产率不减少、标记物稳定，在2-8℃下可保存数月之久，因此吖啶酯或吖啶磺酰胺是一类非常有效的化学发光标记物。
发光类型
这类化合物发光为闪光型，加入发光启动试剂后,0.4s左右发射光强度达到最大，半衰期为0.9s左右。吖啶酯或吖啶磺酰胺类化合物应用于CLIA,通常采用的体系是Acridiniumester/H2O2系统，即用吖啶酯或吖啶磺酰胺标记抗体或抗原，用HNO3+H2O2和NaOH作发光启动试剂。有些在发光启动试剂中加入TritonX-100，CTAC，Tween-20等表面活性剂以增强发光。
