许多生物学实验都需要使用生物缓冲液来维持有效的pH值,这很重要,因为蛋白质和酶对pH的变化敏感,因此为当前和下游实验选择正确的至关重要。在本文中,将简要讨论选择生物缓冲液时要考虑的一些重要因素,然后讨论如何准备生命科学中常用的缓冲液。如下表所示,Tris、HEPES、PIPES等生物缓冲液的pH缓冲范围数据。
生物缓冲液pH缓冲范围
Bis-Tris:5.8-7.2
HEPES:6.8-8.2
PIPES:6.1-7.5
Tris/Tris-HCL:7.0-9.0
选择缓冲区时,重要的是要考虑每个缓冲区的优缺点。首先,您计划在实验中使用的试剂的pH范围必须与您选择的缓冲液的pH范围一致。您可以通过查看缓冲液的pH范围或将缓冲液的pKa与要保持实验的pH值进行实际比较来确定它们是否重合。pKa值应在所需pH值的一个单位内。
此外,您必须考虑浓度,生物缓冲液毒性,温度和反应性。生物缓冲液的浓度必须足以说明您计划在实验中使用的酸或碱的量。您计划使用的pH改变成分越多,所需的生物缓冲液浓度就越高。生物缓冲液毒性非常重要,因为某些缓冲液可能会对正在使用的细胞产生毒性,因此,如果不确定毒性,可以在实验中使用生物缓冲液之前先对细胞进行测试。还应确保决定使用的生物缓冲液不会在实验中产生不需要的反应。
如今,生物缓冲液的型号种类越来越多,并且应用领域也越来越广。导致市场上的生物缓冲液长期处于供不应求的情况,特别是Tris缓冲液长期处于有价无市的处境。在这里推荐一家公司,湖北新德晟材料有限公司。
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