化学名:2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]ethanesulfonicacid 中文名:羟乙基哌嗪乙硫磺酸 分子式:C8H18N2O4S。HEPES 它是一种两性离子有机化学缓冲剂,对细胞无毒性作用,同时它也是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的PH值范围,在PH值为7.2-7.4范围内具有较好的缓冲能力。
好的HEPES缓冲液具有以下特征:
1、pKa值介于6.0和8.0之间
2、高溶解度
3、膜不透性
4、对生化反应影响有限
5、极低的可见光和紫外线吸收
6、耐化学作用和酶解作用
7、易于制备
广泛用于多种生物化学反应,并在某些细胞培养基中用作缓冲试剂,它最大的优点是在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的PH值。细胞培养基中的HEPES浓度范围为10mM至25mM,注意HEPES不为细胞供给营养,只有在细胞培养过程中需要长时间在CO2培养箱外处理细胞时,才将其加入培养基,增强缓冲能力。
HEPES的使用方法有两种:
1、按照所需浓度直接加入到配置的培养溶液中,过滤除菌,每1000毫升培养液中加入2.38克HEPES,溶解后用1N NaOH调PH至7.2,过滤除菌后可使用。此时HEPES的使用浓度为10mmol/L。
2、配成100x贮存液(1mol/L),取23.8gHEPES溶于90ml的双蒸水中,用1NNaOH调PH至7.5-8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌分小瓶装,4摄氏度至20摄氏度保存。使用前取99ml培养液加入1ml贮存液最终应用浓度仍为10mmol/L
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