种类之多我相信不需我多说,不管是懂还是不懂得人都知道。所以我们在选择上也就存在很多不确定性。不知道哪种才是你需要的,哪种才是适合的。针对这个问题,德晟作为生物缓冲剂的厂家,教你如何选择。
缓冲范围
每个缓冲液的pH值范围内的缓冲能力最高。该容量通常由缓冲区的pKa决定。您必须选择pKa值接近所需范围中间值的缓冲液(通常,建议使用pKa值至少在目标pH值的一个pH单位内的缓冲液)。
实验过程中的pH值变化
重要的是要考虑在实验过程中pH值可能会升高还是降低。如果您期望pH值会增加,则必须选择pKa稍高于实验开始时的最佳值的缓冲液。相反的情况也一样:如果期望pH值降低,则选择pKa较低的缓冲液。
缓冲液浓度
必须调整缓冲液的浓度,以具有足够的容量供实验系统使用。总之,如果缓冲液的浓度太低,它将无法稳定溶液的pH值。相反,如果浓度太高,则缓冲液很可能会影响实验。通常,建议使用高于25 mM的浓度。
对于不主动交换氢质子的系统,通常建议浓度为25-100mM。对于可能发生质子交换的系统,建议使用比被交换质子的摩尔浓度高20倍的缓冲剂浓度。
在制备缓冲溶液时,切记将溶液浓度调至预定使用浓度。
温度变化
必须根据将要进行实验的温度来设置缓冲溶液的pH。温度直接影响缓冲液的pKa,进而影响系统的pH值和缓冲能力。在生物系统中这种情况可能非常关键,在生物系统中,需要准确的氢离子浓度才能使反应系统以最高效率运行。
某些缓冲液(例如PIPES)的pKa对温度变化不太敏感,但是,其他选项(如TRIS,TAPS,TES或Tricine)受这些变化的影响更大。