目前国内的化学发光免疫分析技术已突飞猛进,逐步与国际发达国家水平接轨,其中化学发光试剂主要围绕吖啶酯类发光试剂和鲁米诺类试剂展开,那么谁将成为的核心C位呢?
吖啶酯化学发光试剂
鲁米诺与吖啶酯的区别:
吖啶酯类和鲁米诺都是化学发光免疫检测分析CLIA中应用非常广泛的发光试剂,两者有很大的区别,吖啶酯与鲁米诺相比,最直观的是灵敏度要高很多。
吖啶酯的价格远高于鲁米诺,吖啶酯类发光试剂的价格通常以毫克或克计价,平均每毫克几百元;而鲁米诺则是以克或千克计价,克价在几十到上百不等,所以说价差还是比较大的。
鲁米诺、异鲁米诺及其衍生物是最早使用的一类化学发光物质,需要使用催化剂过氧化物酶POD及增强剂,这将导致背景发光增强,使测量本底升高,从而限制了这一技术的灵敏度和它的应用及发展。
吖啶酯的发光效率高,且发光体系简单,不需要加入催化剂,本底低,标记简单。由于传统吖啶酯AE-NHS的热稳定性不是很好,此后又相继研究合成了较AE-NHS更稳定的吖啶酯衍生物并应用于CLIA。例如DMAE-NHS被证明具有良好的热稳定性和发光性能。
吖啶类发光试剂反应灵敏度非常高,激发液的加入导致反应体系立即释放约430nm的光子,通过使用标准光度计(luminometer)计数光子数量就可检测蛋白质的浓度。因为此发光过程是十分短暂(整个过程在2秒钟内完成),样品必须直接放在光度计内部光子探测器前面。蛋白质、多肽、抗体、核酸都可以用吖啶酯标记。标记化合物在碱性过氧化氢的激发下快速发光,通过收集光子可以检测到标记化合物。
吖啶酯在CLIA中各方面性能显然是优于鲁米诺的,不过它的价格和需要的设备成本更高一些, 在一些检测要求相对低一点的情况是不需要用吖啶酯的。吖啶酯和鲁米诺这两类试剂德晟都有研发提供,可以满足不同的检测需求。